實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)公司產(chǎn)品僅用于科研特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
商品詳情:
英文名稱:TSPAN6
別 名:Putative NF kappa B activating protein 321; Putative NF-kappa-B-activating protein 321; T245; T245 protein; Tetraspan TM4SF; Tetraspanin 6; Tetraspanin TM4 D; Tetraspanin TM4-D; Tetraspanin TM4D; Tetraspanin-6; Tm4sf; TM4SF6; Transmembrane 4 superfamily member 6; TSN6_HUMAN; TSPAN 6; Tspan-6; TSPAN6; Tspan6 protein.
研究領(lǐng)域:腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
抗體來源:Rabbit
克隆類型:Polyclonal
交叉反應(yīng): Mouse, (predicted: Human, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Sheep, )
產(chǎn)品應(yīng)用:ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復(fù))
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理論分子量:28kDa
細(xì)胞定位:細(xì)胞膜
性 狀:Liquid
濃 度:1mg/ml
免 疫 原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human TSPAN6: 1-100/245 <Extracellular>
亞 型:IgG
純化方法:affinity purified by Protein A
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng):This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
Subcellular Location:
Membrane; Multi-pass membrane protein.
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
四分子交聯(lián)體6抗體(四旋蛋白) | 50ul、100ul、200ul | CS-A4166 |
抗體的標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):
1.如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性;
6.還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合;
7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的會(huì)對(duì)化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用;
8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。
一抗和二抗的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結(jié)合。
第二抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對(duì)抗原的抗體,二抗是針對(duì)一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說,抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。
一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán),而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)(底物和二抗)。
一抗:可以特異結(jié)合底物,就是識(shí)別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。
二抗:可以和一抗結(jié)合,并帶有可以被檢測出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),則不需要二抗。但這樣成本很高,因?yàn)橐环N一抗只識(shí)別一種底物。所以如今的設(shè)計(jì)一般是二抗帶上可檢測標(biāo)記,再來檢測一抗。而一抗識(shí)別底物。這樣,當(dāng)一抗結(jié)合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。
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